【样品处理】

整体测定法

选取油菜、菠菜有代表性的样品，擦去表面泥土，剪成1cm左右见方碎片，称取3g放入一次性样品处理杯中，加入10mL缓冲液，摇匀，静置5min以上，提取液浑浊时用滤纸过滤，取上清滤液待测。

整株提取法（适用于韭菜、芹菜等对酶有一些刺激性的蔬菜样品）

选取韭菜、芹菜有代表性的样品，擦去表面泥土，称取试样3g（请勿剪碎）置于一次性样品处理杯中，加入10mL缓冲液，残缺面不得接触缓冲液，摇匀，静置5min以上，提取液浑浊时用滤纸过滤，取上清滤液待测。

【测试】

对照测试：于反应管中加入3mL缓冲液，再分别加入100μL显色剂和100μL胆碱酯酶，混匀，37℃水浴放置10min。加入100μL底物，摇匀并立即倒入比色皿中，放入仪器检测，记录对照的吸光度变化值ΔΑ0。

样品测试：于反应管中加入3mL待测样品液，再分别加入100μL显色剂和100μL胆碱酯酶，混匀，37℃水浴放置10min后加入100μL底物，摇匀并立即倒入比色皿中，放入仪器检测，记录样品的吸光度变化值ΔΑt。

操作提示：在加底物的环节中，可预先将底物加入比色皿，待静置时间一到，马上将反应管中的反应液倒入已经加有底物的比色皿，并迅速放入测试通道进行测试。这样可以减少同时检测多个样品时因加底物时间过长而造成的误差。

结果判定：

按以下表达式计算出抑制率：抑制率(%)=[(ΔΑ0－ΔΑt)/ΔΑ0]×100

以农残检测仪检测时其抑制率一般可自动计算。若样品抑制率<50%，表示被测果蔬农残未超标，为阴性结果。若样品抑制率≥50%，需做2次以上重复检测（复检）。每个样品有2次以上的不合格时，表示被测果蔬农残超标，为阳性结果。多次检测仍呈阳性需用气相色谱等仪器做进一步确认。

【注意事项】

酶活性要求：本试剂盒中酶试剂正常活性ΔΑ>0.3。若要求ΔΑ值控制在0.2~0.3之间，可根据ΔΑ测定值自行增减酶量。

保存：试剂盒应保存于2~8℃冰箱，保质期12个月。

使用：任何试剂使用时，用一瓶打开一瓶，用完后才使用新的，防止变质。

器具专用原则：任何用于移液的器具、容器和枪头都应各自做好标记，单独使用，以免交叉污染。

试剂只出不入原则：测试时，从任何试剂瓶吸出的试剂，禁止再次注射回试剂瓶。

环境温度对测试的影响：当环境温度过低时（一般低于20℃），测试时需作必要保温措施；产品从冰箱取出后需恢复到室温才可使用。

用检测管与试剂盒中的比色卡进行比较，以相近的色阶进行估读，若检测管颜色介于两个浓度之间，则以较高浓度值的色阶进行估读。

注：快检检测结果仅作为快速检测手段，若检测结果为检出，请重复检测2次，并建议将样品送实验室进行定量检测。